牛血清白蛋白残留量测定法

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3411 牛血清白蛋白残留量测定法    本法系采用联免疫法测定供试品中残余牛血清白蛋白（BSA）含量。
    供试品溶液的制备  供试品如为冻干剂型，测前应按标示量溶后混匀，室温静置30分钟，检测前应再次混匀。供试品如为液体剂型可直接用于检测。
    干扰试验  首次采用该法检测的供试品进行干扰试验。
    制备溶液Ⅰ （供试品倍比稀释）、溶液Ⅱ供试品和30ng/ml内控标准品等量混合）和溶液Ⅲ（30ng/ml的内控标准品倍比稀释）。当供试品溶液BSA量高于试剂盒测定范围中点时，则2倍稀释后制备溶液Ⅰ和溶液Ⅱ。溶液Ⅰ、溶液Ⅱ可倍比稀释测定，溶液Ⅲ应多孔测定（至少10孔以上），并在试验间均匀添加。按测定法操作，分别测定溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ的BSA含量，溶液Ⅰ与溶液Ⅱ的含量之差应在溶液Ⅲ含量测定值的95%可信区间内，表明供试品不会对测法产生干扰作用。
    测定法 按试剂盒说明书进行，并采用试剂盒提供的供试品稀释液稀释供试品，供试品应至少进行2个稀释度测定，每个稀释度做双平行测定。试剂盒标准品的吸光度、内控参考品测定值、标准品线性相系数、双孔测定吸光度均应在试剂盒要求范围内，试验有效。以标准品溶液的浓度对其相应的吸光度作直线回归，将供试品的吸光度代入直线回归方程，再乘以稀释倍数，计算出供试品中BSA量。
    【附注】（1）当同一供试品的低稀释度吸光度明显低于高稀释度吸光度时，可能存在HOOK效应或操作失误，需重试或调整稀释倍数进行检测。
    （2）测定BSA含量的容器具应专用，防止实验室中BSA污染。

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