聚乙二醇残留量测定法

3202 聚乙二醇残留量测定法
    本法系依据聚乙二醇与钡离子和碘离子形成复合物（1：1），用比色法测定聚乙二醇含量。
    测定法 取供试品适量，用水稀释，使蛋白质浓度不高于1%，即为供试品洛液。精密量取供试品溶液1.0ml，加入0.5mol/L高氯酸溶液5.0ml，混匀，室温放置15分钟，以每分钟4000转离心10分钟。取上清液4ml，加入氯化钡溶液（称取氯化钡5g，加水溶解至100ml）1.0ml和0.1mol/L碘溶液（称取碘化钾2.0g，加少量水溶解，然后加碘1.3g，再加水至50ml，摇匀）0.5ml，混匀，室温反应15分钟，照紫外-可见分光光度法（通则0401） ，在波长535nm处测定吸光度；同时以1ml水代替供试品溶液，同法操作，即为空白对照。
    另精密称取与供试品中聚乙二醇分子量相同的聚乙二醇适量，加水溶解，并制成每1ml含聚乙二醇100μg的溶液，即为聚乙二醇对照品贮备液。
    取按下表制备的每1ml含10～50μg的聚乙二醇对照品溶液1.0ml，加入0.5mol/L高氯酸溶液5.0ml，混匀，自“室温放置15分钟”起，同法操作。
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    聚乙二醇含量/μg·ml-1                10   20   30   40   50
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    聚乙二醇对照品贮备液/ml               0.2  0.4  0.6  0.8  1.0
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    约1%蛋白质溶液/ml                     0.2  0.2  0.2  0.2  0.2
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    水/ml                                 1.6  1.4  1.2  1.0  0.8
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    以聚乙二醇对照品溶液的浓度（μg/ml） 对其相应的吸光度作直线回归，将供试品溶液吸光度代入直线回归方程，计算出供试品溶液中聚乙二醇含量F（μg/ml）。
    按下式计算：
    供试品聚乙二醇含量（g/L）= F×n×10-3
    式中 F为供试品溶液中聚乙二醇含量，μg/ml；
    n为供试品稀释倍数。
    【附注】 （1）整个比色过程应在试剂加入后的15～45分钟内完成，否则将要影响结果。
    （2）本法的灵敏度随被测聚乙二醇的分子量的增加而提高。
    （3）1%的蛋白质溶液系用不含聚乙二醇的蛋白质溶液配制。