冻干肉毒抗毒素

冻干肉毒抗毒素Donggan Roudu KangdusuBotulinum Antitoxins，Freeze-dried
      本品系由肉毒梭菌A、B、C、D、E、F六型毒素或类毒素分别免疫马所得的血浆，经冑酶消化后纯化制成的冻干抗毒素球蛋白制剂。用于预防和治疗A、B、C、 D、E、F型肉毒中毒。
      1 基本要求
      生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
      2 制造
      2.1 抗原与佐剂
      应符合“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定。
      2.2 免疫动物及血浆
      2.2.1 免疫动物
      免疫用马匹必须符合“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定。
      2.2.2 采血与分离血浆
      按“免疫血清生产用马匹检疫和免疫规程”的规定进行。用动物法或其他适宜的方法测定免疫血清效价，符合下列规定时，即可采血。分离之血浆可加入适宜防腐剂，并应做无菌检查（通则1101）。
      各种免疫血清的效价应不低于以下标准：
      A型    1500IU/ml 
      B型    800IU/ml 
      C型    300IU/ml 
      D型    800IU/ml 
      E型    800IU/ml 
      F型    300IU/ml 
      2.3 胃酶        
      用生理氯化钠溶液将胃酶配制成1mg/ml溶液，进行类A血型物质含量测定（通则3415），应不高于1.0μg/ml。 
      2.4 原液
      2.4.1 原料血浆
      原料血浆的肉毒抗毒素效价（通则3510）应不低于以下标准：
      A型    1000IU/ml 
      B型    600IU/ml  
      C型    200IU/ml  
      D型    600IU/ml  
      E型    600IU/ml  
      F型    200IU/ml  
      血浆在保存期间，如发现有明显的溶血、染菌及其他异常现象，不得用于制备。
      2.4.2	制备
      2.4.2.1 消化
      将免疫血浆稀释后，加入适量胃酶，如果必要还可加入适量甲苯，调整适宜pH值后，在适宜温度下消化一定时间。
      2.4.2.2 纯化
      采用加温、硫酸铵盐析、明矾吸附等步骤进行纯化。
      2.4.2.3 浓缩、澄清及除菌过滤 
      浓缩可采用超滤或硫酸铵沉淀法进行。可加入适量硫柳汞或间甲酚作为防腐剂，然后澄清、除菌过滤。
      纯化后的抗毒素原液应置2～8℃避光保存至少1个月作为稳定期。
      2.4.3 原液检定 
      按3.1项进行。
      2.5 半成品 
      2.5.1 配制
      将检定合格的原液，按成品规格以灭菌注射用水稀释，调整效价、蛋白质浓度、pH值及氯化钠含量，除菌过滤。
      2.5.2 半成品检定 
      按3. 2项进行。
      2.6 成品 
      2.6.1 分批
      应符合“生物制品分批规程”规定。
      2.6.2 分装及冻干
      应符合“生物制品分装和冻干规程”及通则0102有关规定。在冻干过程中制品温度应不高于35℃，真空或充氮封口。
      2.6.3 规格
      复溶后A型每瓶4.0ml，含肉毒抗毒素10000IU； B型每瓶2.0ml，含肉毒抗毒素5000IU； C型每瓶7.0ml， 含肉毒抗毒素5000IU； D型每瓶2.0ml，含肉毒抗毒素5000IU； E型每瓶4.0ml，含肉毒抗毒素5000IU； F型每瓶7.0ml，含肉毒抗毒素5000IU。
      2.6.4 包装
      应符合“生物制品包装规程”及通则0102有关规定。
      3 检定 
      3.1 原液检定 
      3.1.1 抗体效价 
      依法测定（通则3510）。
      3.1.2 无菌检查
      依法检查（通则1101），应符合规定。
      3.1.3 热原检查
      依法检查（通则1142），应符合规定。注射剂量按家兔体重每1kg注射3.0ml。 
      3.2 半成品检定 
      无菌检查
      依法检查（通则1101），应符合规定。
      3.3 成品检定 
      除水分测定、装量差异检查外，应按标示量加入灭菌注射用水，复溶后进行以下检定。
      3.3.1 鉴别试验
      每批成品至少抽取1瓶做以下鉴别试验。
      3.3.1.1 动物中和试验或特异沉淀反应 
      按通则3510进行，供试品应能中和相应各型的肉毒毒素或类毒素；或采用免疫双扩散法（通则3403），供试品应与相应各型的肉毒毒素或类毒素产生特异沉淀线。
      3.3.1.2 免疫双扩散或酶联免疫吸附试验 
      采用免疫双扩散法（通则3403）进行，供试品仅与抗马的血清产生沉淀线；或采用酶联免疫法（通则3418），供试品应与马IgG抗体反应呈阳性。
      3.3.2 物理检查 
      3.3.2.1 外观
      应为白色或淡黄色的疏松体，按标示量加入注射用水，轻摇后应于15分钟内完全溶解为无色或淡黄色的澄明液体，无异物。
      3.3.2.2 渗透压摩尔浓度 
      应符合批准的要求（通则0632）。
      3.3.2.3 装量差异 
      依法检查（通则0102），应符合规定。
      3.3.3 化学检定 
      3.3.3.1 水分
      应不高于3.0%（通则0832）。
      3.3.3.2 pH 值
      应为6.0～7.0（通则0631）。
      3.3.3.3 蛋白质含量 
      应不高于170g/L（通则0731第一法）。
      3.3.3.4 氯化钠含量
      应为 7.5～9.5g/L（通则3107）。
      3.3.3.5 硫酸铵含量 
      应不高于1.0g/L（通则3104）。
      3.3.3.6 防腐剂含量
      如加硫柳汞，含量应不高于0.1g/L（通则3115）；如加间甲酚，含量应不高于2.5g/L（通则3114）。
      3.3.3.7 甲苯残留量
      生产工艺中如添加甲苯，需检测甲苯残留量，应不高于0.089%（通则0861）。
      3.3.4 纯度
      3.3.4.1 白蛋白检查
      将供试品稀释至2%的蛋白质浓度，进行琼脂糖凝胶电泳分析（通则0541第三法），应不含或仅含痕量白蛋白迁移率的蛋白质成分。
      3.3.4.2 F（ab'）2 含量
      采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（通则0541第五法）测定，上样量约25μg，F（ab'）2含量应不低于60%；IgG含量应不高于5%。
      3.3.5 抗体效价
      各型肉毒抗毒素效价及比活性应不低于以下标准（通则3510）：
      A型    2000IU/ml；每1g蛋白质含20000IU 
      B型    2000lU/ml；每1g蛋白质含20000IU 
      C型    500IU/ml；每1g蛋白质含5000IU 
      D型    2000IU/ml；每1g蛋白质含20000IU 
      E型    1000IU/ml；每1g蛋白质含10000IU 
      F型    500lU/ml；每1g蛋白质含5000IU 
      每瓶肉毒抗毒素装量应不低于标示量。
      3.3.6 无菌检查
      依法检查（通则1101），应符合规定。
      3.3.7 热原检查
      依法检查（通则1142），应符合规定。注射剂量按家兔体重每1kg注射3.0ml。
      3.3.8 异常毒性检查 
      依法检查（通则1141），应符合规定。
      4 稀释剂
      稀释剂为灭菌注射用水，稀释剂的生产应符合批准的要求。
      灭菌注射用水应符合本版药典（二部）的相关规定。
      5 保存、运输及有效期
      于2～8℃避光保存和运输。自生产之日起，有效期为60个月。
      6 使用说明
      应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。